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第一周 大自然的馈赠——生物药物 第一节 课堂测验
1、 我国的三大药源指的是
答案: 化学药物;
生物药物;
中药
2、 以下属于生物药物主要类别的是
答案: 基因重组多肽和蛋白质 ;
基因药物;
天然生化药物;
合成与部分合成的生物药物
3、 生物制药工业发展大致包括以下哪些阶段
答案: 传统生物制药发展阶段 ;
近代生物制药发展阶段 ;
现代生物制药发展阶段
4、 以下能体现现代生物制药发展阶段特点的是
答案: 以基因工程为主导 ;
应用蛋白质工程技术可制造自然界不存在的新蛋白质
5、 生物药物可以用于
答案: 预防 ;
诊断 ;
治疗 ;
康复保健
6、 以下属于生物制品的是
答案: 疫苗 ;
菌苗 ;
血液制品;
动物毒素
7、 以下属于生物制药工艺学研究内容范畴的是
答案: 生物药物的研究;
生物药物的生产;
生物药物制剂和综合应用
8、 以下关于生化制药正确的是
答案: 运用生物化学的理论、方法、技术和研究成果;
从生物体分离、纯化得到的一些重要生理活性物质;
通常都是维持生命正常活动所必需的物质;
大分子生化药物通常需具备严格的空间构象
9、 以下属于生物技术制药研究的主要内容有
答案: 基因工程技术;
蛋白质工程技术;
动植物细胞大规模培养技术;
抗体工程技术
10、 微生物制药过程的关键技术包括
答案: 菌种选育 ;
工业发酵;
发酵产物的提炼技术和质量控制
第一周 大自然的馈赠——生物药物 第二节 课堂测验
1、 生物药物具有以下哪些药理学特性
答案: 药理活性高;
治疗针对性强;
毒副作用较少、营养价值高;
生理副作用常有发生
2、 生物药物具有以下哪些理化特性
答案: 大多结构复杂、稳定性差;
对其有效成分的检测，不仅需要理化检验指标，还需生物活性检测
3、 以下属于基因工程法重组表达获得的药物是
答案: 干扰素α2b;
EPO
4、 以下属于β-内酰胺类抗生素的是
答案: 青霉素;
头孢菌素
5、 以下属于基因药物的是
答案: 反义药物ISIS2922;
重组人P53腺病毒注射液
6、 以下属于多肽和蛋白类药物的是
答案: 降钙素;
明胶
7、 以下属于酶类药物的是
答案: 链激酶;
凝血酶
8、 以下属于基因药物的是
答案: 反义药物;
干扰核酸;
核酶
9、 以下属于医学生物制品的是
答案: 流感疫苗;
卡介苗;
结核菌素
10、 以下属于多糖类药物的是
答案: 肝素;
透明质酸;
硫酸软骨素
第一周 大自然的馈赠——生物药物 第三节 课堂测验
1、 以下关于疫苗说法正确的是
答案: 疫苗的英文是 vaccine;
病毒疫苗的主要成分是病毒表面抗原
2、 以下关于抗体说法正确的是
答案: 治疗性抗体具备治疗专一性强、 疗效好、 副反应小的优点 ;
抗体从化学本质上说属于蛋白质或者糖蛋白
3、 抗体具有以下特点
答案: 治疗专一强;
疗效好;
副反应小
4、 以下可以延长治疗蛋白体内半衰期的方法有
答案: 人血清白蛋白融合蛋白;
抗体Fc融合蛋白;
PEG修饰蛋白
5、 生物技术药物的研究发展重点包括
答案: 研究开发新型疫苗;
研究开发新型抗体药物;
开发新的高效表达系统;
生物药物新剂型研究
6、 生物技术制药常用的表达系统有
答案: E.coli表达系统;
酵母表达系统;
哺乳动物细胞表达系统
7、 关于多肽类药物描述正确的是
答案: 毒性低;
特异性高;
有些多肽为生物体内重要的代谢调控因子;
可通过化学法合成
8、 以下说法正确的是
答案: 抗体偶联药物可以实现靶向治疗;
抗体Fc融合蛋白可以延长蛋白质的体内半衰期;
抗体Fc融合蛋白可以形成双价作用，提高与靶蛋白的结合力;
融合蛋白可具有双功能作用
9、 药物作用靶涉及
答案: 受体;
酶;
离子通道;
免疫系统;
转运体
10、 抗体-药物偶联物是指
答案: 抗体与药物共价结合形成偶联物;
将抗体的靶向作用和药物的治疗作用结合起来，实现靶向性治疗
第二周 揭秘生物制药技术——工艺技术基础 第一节 课堂测验
1、 生化制药的生物材料（biological material）来源有
答案: 动物脏器;
血液、分泌物和其他代谢物;
海洋生物;
微生物
2、 以下关于生化药物生产原料的选择原则，说法正确的是
答案: 原料新鲜、无污染;
有效成分含量高;
原料中杂质含量少，便于分离纯化
3、 可以用于生化活性物质提取的方法有
答案: 酸、碱、盐水溶液提取法;
表面活性剂提取法;
有机溶剂固-液提取法;
有机溶剂液-液萃取法
4、 生物大分子提取过程中常采用的保护措施有
答案: 采用缓冲系统;
添加保护剂;
添加酶抑制剂;
尽量采用温和条件
5、 生化活性物质浓缩可采用的方法有
答案: 盐析浓缩;
用聚乙二醇浓缩;
有机溶剂沉淀法;
超滤浓缩
6、 生物制药工艺中分离制备方法的特点包括
答案: 生物材料组成非常复杂，杂质多;
有些化合物在生物材料中的含量极低;
多采用 “逐级分离”
7、 由于目的蛋白和杂蛋白分子量差别较大，拟根据分子量大小分离纯化并获得目的蛋白，可采用
答案: 凝胶过滤法;
差速离心
8、 以下分离纯化的实验方案，说法正确的是
答案: 一种物质可以有多种分离纯化方法;
合理安排纯化方法顺序，减少工作量，提高效率;
判定分离纯化步骤的好坏，要注意方法的分辨力、重现性和回收率
9、 冷冻干燥是在低温、低压条件下, 利用水的升华性能而进行的一种干燥方法。冻干制品的质量要求是
答案: 生物活性不变;
外观色泽均匀;
残留水分低;
溶解速度快
10、 根据分子极性大小及溶解度不同进行分离的是
答案: 溶剂提取法;
盐析法;
有机溶剂分级沉淀法
第二周 揭秘生物制药技术——工艺技术基础 第二节 课堂测验
1、 诱变育种选择出发菌株时，应考虑
答案: 菌株稳定性;
选用具备某种优良特性的菌株;
对诱变剂敏感性;
菌种的生理状态及生长发育时间
2、 下列菌种保藏方法中能保藏菌种5年以上的方法有
答案: 冷冻干燥保藏法;
液氮超低温保藏法
3、 微生物生长的营养要素有
答案: 水;
碳源、氮源;
无机盐;
生长因子
4、 常用的灭菌方法有
答案: 加热灭菌;
辐射灭菌;
介质过滤除菌;
化学灭菌
5、 生产上培养基与发酵设备通常采用蒸汽灭菌法，以下说法正确的是
答案: 用专门的灭菌设备进行连续灭菌称为连消;
连消与实消比较，培养基受热时间短，营养成分破坏少
6、 发酵过程的主要控制参数中，生物参数包括
答案: 菌丝状态;
菌丝浓度
7、 下列说法正确的是
答案: 补料分批发酵又称半连续发酵;
在连续发酵中，通常难以保证纯种培养，菌种可能发生变异
8、 发酵过程影响参数的控制，下列说法正确的有
答案: 在发酵过程中可以采用直接补加酸或碱和补料的方式来控制pH;
CO2浓度可通过通气搅拌来控制，对其形成的碳酸，可用碱中和;
气泡会使发酵罐的装料系数减少，氧传递系数减小，严重时造成染菌
9、 菌种选育技术包括
答案: 杂交育种;
原生质体融合;
基因工程技术
10、 菌种的纯化一般采用
答案: 划线分离法;
稀释分离法
第二周 揭秘生物制药技术——工艺技术基础 第三节 课堂测验
1、 以下属于人工合成目的基因途径的是
答案: 化学合成 ;
酶促方法;
PCR
2、 以下关于PCR技术的说法正确的是
答案: 在PCR反应中，引物过长或者过短都会使反应的特异性降低;
PCR模板可以是单链DNA、双链DNA或者由RNA反转录成的cDNA;
PCR涉及高温变性、低温退火、适温延伸3个反应
3、 以下关于重组DNA分子构建的说法正确的是
答案: 常见的基因载体有质粒、噬菌体、黏粒、病毒载体等 ;
目的基因必须与载体连接形成重组DNA分子并转入相应的宿主细胞，才能实现目的基因的克隆与表达;
与黏性末端相比，平齐末端的连接效率较低
4、 以下关于重组DNA分子导入宿主细胞的说法正确的是
答案: 基因导入的方法主要有转化、转染等，也可采用电融合、显微注射和基因枪等技术;
微生物细胞、动物细胞、植物细胞等可作为重组DNA分子的受体细胞;
利用化学法、电击法或噬菌体转导可将DNA重组体导入微生物细胞
5、 以下关于基因表达系统的说法正确的是
答案: 具有活性的EPO不能在大肠埃希菌表达系统进行表达，因为该系统不能进行翻译后修饰;
哺乳动物表达系统可获得结构与天然蛋白相一致的活性蛋白，但其培养技术难度大、成本高、生产周期长
6、 以下关于动物细胞培养的说法正确的是
答案: 培养细胞的最适温度为37℃±0.5℃，偏离此温度，细胞生长会受到影响，甚至导致死亡;
影响动物细胞培养的条件主要有培养基、气体、pH、温度、水质、渗透压及灭菌条件等
7、 以下属于植物组织细胞无菌培养技术的是
答案: 悬浮培养;
愈伤组织培养;
分生组织培养;
器官培养
8、 以下关于固定化酶的说法正确的是
答案: 广义的固定化酶包括固定化酶和固定化细胞两类;
酶经固定化后，稳定性有所提高;
固定化酶可反复使用，提高了使用效率、降低了成本;
固定化酶极易和产物分离，酶不混入产物中，简化了产品的纯化工艺
9、 以下关于固定化酶性质的说法正确的是
答案: 酶经过固定化后活力大都下降但稳定性有所提高 ;
固定化酶的稳定性主要包括操作稳定性、热稳定性、贮藏稳定性及对蛋白酶的稳定性
10、 以下属于植物组织细胞无菌培养技术的是
答案: 悬浮培养;
愈伤组织培养;
分生组织培养;
器官培养
11、 以下关于固定化酶性质的说法正确的是
答案: 酶经过固定化后活力大都下降但稳定性有所提高;
固定化酶的稳定性主要包括操作稳定性、热稳定性、贮藏稳定性及对蛋白酶的稳定性
第三周 打破细胞壁垒——细胞破碎 第一节 课堂测验
1、 选择预处理方法的依据包括
答案: 后续操作的要求;
生物活性物质存在方式与特点 ;
目的物稳定性
2、 后续工艺中需用离子交换法，对滤液的哪些方面要求比较严格？
答案: 澄清度 ;
无机离子 (特别是高价离子);
灰份含量（不溶颗粒含量）;
合适的pH
3、 细胞培养液的预处理主要去除下列哪些物质
答案: 一类是可溶性黏胶状物质, 包括核酸、 杂蛋白质、 不溶性多糖等, 这些杂质不仅使培养液黏度提高, 液固分离速度受影响, 而且还会影响后面的提取操作;
一类是某些无机盐, 它们不仅影响成品质量, 而且在采用离子交换法提取时, 由于树脂大量吸附无机离子而减少对目的物的交换
4、 高浓度无机盐促进蛋白等胶体颗粒凝聚主要有下列两方面原因
答案: 加入相反电性的电解质, 能中和胶粒的电性, 降低了双电层的排斥力, 由于热运动的结果就导致胶粒的互相碰撞;
无机盐离子在水中的水化作用, 会破坏胶粒周围的水化层, 使其能直接碰撞而聚集起来
5、 使蛋白质变性的方法包括
答案: 加热;
大幅度改变 pH;
加有机溶剂;
加重金属盐或表面活性剂
6、 絮凝的效果主要受以下什么因素的影响？
答案: 絮凝剂分子量;
絮凝剂用量;
pH 值;
操作条件
7、 以下哪些化学试剂能与蛋白质结合形成复合物沉淀
答案: 鞣酸盐;
三氯乙酸盐;
硫酸锌;
过氯酸盐
8、 黏多糖能与下列哪些物质发生反应形成络合物而沉淀
答案: 十六烷基三甲基溴化铵 (CTAB);
十六烷基氯化吡啶 (CPC)
9、 高价金属离子如 Ca 2 + 的去除，可以通过下列哪些方法
答案: 阳离子交换树脂;
加入草酸钠或草酸
10、 镁离子的去除可以通过下列哪些方法
答案: 三聚磷酸钠;
草酸
11、 以下属于絮凝剂的是
答案: 壳聚糖;
海藻酸钠
12、 可用于去除发酵液中蛋白质杂质的方法有
答案: 加热;
加入絮凝剂;
等电点沉淀
13、 以下关于预处理说法正确的是
答案: 可通过添加硫酸锌沉淀发酵液中的杂蛋白;
使用阳离子交换树脂可去除铁离子以及部分色素
14、 以下关于蛋白质类药物预处理，说法正确的是
答案: 避免高热;
避免强酸、 强碱;
避免剧烈搅拌;
避免重金属离子的作用
15、 关于高价离子的去除说法正确的是
答案: 草酸既可以除去Ca2+也可以去除Mg2+;
离子交换法可以去除某些高价离子同时吸附色素
第三周 打破细胞壁垒——细胞破碎 第二节第三节 课堂测验
1、 细胞破碎方法中，机械法包括：
答案: 高压匀浆法;
高速珠磨法;
超声波
2、 细胞破碎方法中，物理法包括：
答案: 干燥法;
冻融法;
渗透压冲击法
3、 细胞破碎方法中，化学法包括：
答案: 用碱处理细胞;
制成丙酮粉;
采用某些脂溶性有机溶剂;
采用某些表面活性剂
4、 选择细胞破碎方法的依据：
答案: 规模及成本;
目的物的稳定性;
破碎效果;
产物释放率
5、 与常规过滤方式相比, 错流过滤具有如下优点:
答案: 过滤收率高;
滤液质量好;
减少处理步骤;
容易进行扩大生产
6、 常用的细胞破碎方法中，高压匀浆法的特点？
答案: 处理量大;
工业生产上广泛应用;
产热大;
可能造成生物活性物质失活
7、 常用的细胞破碎方法中，超声波破碎的特点？
答案: 产热量大;
适用于小量样品;
散热不易
8、 常用的细胞破碎方法中，渗透压冲击法的特点？
答案: 较温和;
但破碎作用较弱;
常与酶法合用
9、 常用的细胞破碎方法中，酶解法的特点？
答案: 较温和;
成本较高;
一般在实验室中小规模应用
10、 影响液- 固分离的因素
答案: 微生物种类;
发酵液的黏度;
发酵液的pH;
发酵液的温度
11、 以下说法正确的是
答案: 实验室中大肠埃希菌质粒的抽提常用碱裂法破壁;
在提取总RNA时，破壁缓冲液中含有RNA酶抑制剂;
组织自溶法实际上是利用组织中的酶改变细胞结构
12、 以下关于超声波法破壁说法错误的是
答案: 对于大肠埃希菌胞内可溶表达的重组蛋白，超声波法破壁需在温水浴中进行;
对于大肠埃希菌胞内可溶表达的重组蛋白，超声波法破壁时可设定5分钟不间断进行;
对于大肠埃希菌胞内可溶表达的重组蛋白，不能使用超声波法进行破壁
13、 以下可用于大规模工业生产的破壁方法是
答案: 高压匀浆法;
高速珠磨法;
组织自溶法
14、 以下可用作助滤剂的是
答案: 硅藻土;
石棉;
纸浆
15、 关于板框过滤机的说法正确的是
答案: 由多个滤板和滤框交替重叠组成滤室;
过滤面积大，能耐受较高压力;
结构简单，造价较低，动力消耗少
第四周 跨越两相的转移——萃取法 第一、二节 课堂测验
1、 溶剂萃取法具有以下哪些优点？
答案: 对热敏物质破坏少;
操作可连续化, 反应速度快, 生产周期短;
采用多级萃取时, 溶质浓缩倍数大、 纯化度高
2、 下列哪些关于经典的液 – 液萃取的说法是正确的？
答案: 有机溶剂使用量大, 对设备和安全要求高, 需要各项防火防爆等措施;
是用有机溶剂对非极性或弱极性物质进行的萃取;
是一种利用物质在两种互不相溶的液相中分配特性不同而进行的分离过程
3、 应用能斯特 (Nernst) 在 1891 年提出的分配定律 (distribution law)时，须符合下列哪些条件
答案: 必须是稀溶液, 即适用于接近理想溶液的萃取体系;
溶质对溶剂的互溶度没有影响;
溶质在两相中必须是同一分子形式(分子量相等), 即不发生缔合或解离
4、 萃取因素也称萃取比, 其定义为被萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比，其数值与下列哪些因素有关？
答案: 温度;
pH;
溶质在萃取相和萃余相中的解离情况;
萃取剂的用量
5、 下列哪些关于工业上萃取的说法是正确的？
答案: 工业上的萃取过程按操作方式分类, 可分为单级萃取和多级萃取;
工业上萃取操作包括 3 个步骤：混合、分离、溶剂回收;
多级萃取可分为错流萃取和逆流萃取;
与错流萃取相比, 多级逆流萃取的萃取剂耗量较少, 因而萃取液平均浓度较高
6、 下面关于乳化剂的说法正确的包括哪些？
答案: 乳化剂多为表面活性剂;
乳化剂分子结构有共同的特点：一般是由亲油基和亲水基两部分组成的;
乳化剂存在时, 有助于形成稳定的乳浊液;
乳状液有两种类型: 一类是油分散在水中, 简称水包油型乳状液, 用 O/ W 表示; 另一类是水分散在油中, 简称油包水型乳状液, 用 W/ O 表示。
7、 乳化剂所以能使乳状液稳定, 与下列几个因素有关？
答案: 界面膜形成;
界面电荷的影响;
介质黏度
8、 影响乳状液类型的因素有哪些？
答案: 乳化剂分子空间构型的影响;
界面张力的影响;
容器壁性质的影响;
相体积的影响
9、 乳方法有下列几种?
答案: 加入表面活性剂;
加电解质;
离心或稀释;
加热或吸附
10、 常用的表面活性剂类型的去乳化剂包括下列的哪些？
答案: 十二烷基磺酸钠;
十二烷基三甲基溴化铵 (1231);
溴代十五烷吡啶 (PPB)
11、 影响溶剂萃取的因素包括下列的哪些？
答案: 乳化和破乳化;
pH或盐析作用;
温度和萃取时间;
溶剂种类、 用量及萃取方式的选择
12、 选择萃取溶剂应遵守下列哪些原则？
答案: 溶剂的化学稳定性要高, 腐蚀性低, 沸点不宜太高,挥发性要小, 价格便宜, 来源方便, 便于回收;
尽量选择毒性低的溶剂;
分配系数愈大愈好;
料液与萃取溶剂的互溶度愈小愈好
第四周 跨越两相的转移——萃取法 第三、四节 课堂测验
1、 双水相萃取技术是一种新型分离技术, 其特点有
答案: 能保留产物的活性;
可用于蛋白质等生物分子的分离;
整个操作可连续化;
在除去细胞或碎片时, 还可以纯化蛋白质 2 ~ 5 倍
2、 双水相萃取法又称水溶液两相分配技术，它是不同的高分子溶液相互混合可产生两相或多相系统，静置平衡后, 分成互不相溶的两个水相, 常用高聚物有：
答案: 葡聚糖;
PEG;
聚乙二醇
3、 影响双水相萃取的因素有
答案: 成相高聚物的分子量;
成相聚合物浓度;
疏水效应;
温度及其他因素
4、 以下属于双水相萃取技术研究范畴的有
答案: 廉价双水相体系的开发;
双水相亲和分配;
液体离子交换剂
5、 PEG 6000 – (H2PO4)4 来分离纯化干扰素时, 其分配系数可高达170, 而杂蛋白的分配系数只有 0.04, 说明什么？
答案: 干扰素在上相多;
杂蛋白在下相多
6、 关于反胶束以下说法正确的是
答案: 也称反胶团;
是表面活性剂分散在连续的有机相中自发形成的纳米尺度的一种聚集体;
采用此方法分离纯化，蛋白质不容易失活;
其中表面活性剂的非极性基团在外, 与非极性的溶剂接触, 而极性基团则排列在内, 形成一个极性核, 此极性核具有溶解极性物质的能力, 这种聚集体称为反胶束。
7、 用于产生反胶束的表面活性剂有
答案: Triton X ;
AOT;
CTAB
8、 反胶束选择性分离目标蛋白质包括两个过程: 萃取过程和反萃取过程，以下说法正确的是
答案: 萃取过程: 目标蛋白质从主体溶液转移至反胶束溶液中的过程;
反萃取过程: 目标蛋白质从反胶束溶液中转移至第二水相的过程
9、 影响反胶束萃取的因素有
答案: 表面活性剂的种类;
水相pH值;
离子强度;
温度
10、 可以采用反胶束萃取的生物药物有
答案: 蛋白质类药物;
氨基酸;
核酸;
抗生素
第四周 跨越两相的转移——萃取法 第五节 课堂测验
1、 以下说法正确的是
答案: 超临界流体的英文是supercritical fluid;
超临界流体萃取可以在接近室温的条件下进行;
无机盐在高压乙醇中溶解度会增加
2、 要形成超临界流体，应符合哪些条件
答案: 压力高于临界压力;
温度高于临界温度
3、 使用二氧化碳作为超临界流体，具有以下哪些特点
答案: 临界温度接近室温;
无毒、无味、不可燃;
可防止空气中氧的影响;
较容易提纯与分离，价格便宜
4、 超临界流体萃取的应用包括
答案: 中压区的选择性萃取;
高压区的全萃取
5、 温度对超临界流体萃取的影响有
答案: 温度升高物质在流体中的溶解度变化情况和压力大小有关;
温度升高流体密度下降
6、 物料性质对超临界流体萃取有哪些影响
答案: 对于细胞内活性物质，破壁处理后可以提高萃取效率;
破坏物料表面连续性水膜可以提高萃取效率
7、 对于工业规模超临界萃取过程，以下操作方式正确的是
答案: 恒温萃取时，萃取釜的压力大于分离釜;
恒压萃取时，萃取釜的温度小于分离釜
8、 超临界流体萃取技术的特点体现在
答案: 用二氧化碳作为流体时，分离过程可在常温下进行;
无溶剂残留;
分离工艺流程简单
9、 关于超临界流体结晶技术，以下说法正确的是
答案: 可以得到超细甚至纳米级晶体;
可避免有机溶剂重结晶中的溶剂残留问题;
可用于制备胰岛素结晶;
可实现在常温进行重结晶
10、 以下说法正确的是
答案: 考虑到生物物质的热稳定性，超临界流体萃取主要使用二氧化碳流体;
超临界流体萃取设备属于高压设备
第五周 精华的积累和浓缩——沉淀法 第一、二节 课堂测验
1、 固相析出法主要包括
答案: 盐析法;
有机溶剂沉淀法;
等电点沉淀法;
结晶法
2、 当向蛋白质溶液中逐渐加入中性盐时, 会产生两种现象:
答案: 低盐情况下, 随着中性盐离子强度的增高, 蛋白质溶解度增大, 称盐溶现象;
在高盐浓度时, 蛋白质溶解度随之减小, 发生了盐析作用
3、 盐析方法分为两种类型:
答案: 在一定的 pH 和温度下改变离子强度进行盐析, 称作KS盐析法;
在一定离子强度下仅改变 pH 和温度进行盐析, 称作β盐析法
4、 分离的后期阶段, 为了求得较好的分辨率, 或者为了达到结晶的目的, 有时应用β 盐析法。这是因为
答案: 溶质溶解度变化缓慢且变化幅度小;
分辨率高
5、 影响盐析的因素
答案: 蛋白质浓度;
无机盐的种类;
溶质 (蛋白质等) 种类;
温度
6、 影响盐析的因素有
答案: 蛋白质浓度;
无机盐的种类;
溶质 (蛋白质等) 种类;
pH
7、 选用盐析用盐要考虑以下几个方面:
答案: 盐析作用要强;
盐析用盐要有足够大的溶解度;
盐析用盐在生物学上是惰性的;
来源丰富、 经济
8、 以下盐析操作方法可以用于纯化目的蛋白的是？
答案: 分步盐析法;
重复盐析法;
反抽提法;
盐析去除杂蛋白
9、 盐析注意事项
答案: 防止局部过浓;
对于固体盐投入法, 须先将盐粒磨细, 在不断搅拌下分批缓缓加入到溶液中;
用饱和盐溶液进行盐析时同样需要慢慢加入并不断搅拌;
一般多在室温下进行盐析
10、 蛋白质纯化中常用硫酸铵作为盐析剂，以下关于其优点的说法正确的是
答案: 价廉、在水中溶解度大;
溶解度随温度变化小，在低温下仍具有较大溶解度;
对大多数蛋白质的活力无损害
11、 与盐析法相比, 有机溶剂沉淀法具有如下优点
答案: 易挥发除去;
产品纯净
12、 影响有机溶剂沉淀效果的因素包括
答案: 有机溶剂种类及用量;
某些金属离子的助沉淀作用;
无机盐的含量;
温度
13、 以下关于有机溶剂沉淀操作说法正确的是
答案: 可以使用有机溶剂沉淀法去除杂蛋白质;
有机溶剂沉淀法常用于多糖的分离纯化;
有机溶剂沉淀法常用于沉淀核酸
14、 使用有机溶剂沉淀法时，如果要提高目的蛋白质的沉淀量，可以采用
答案: 增加有机溶剂用量;
添加适量的无机盐;
将样品浓缩后再进行有机溶剂沉淀
15、 生物药物分离纯化时，有机溶剂沉淀时常用的溶剂有
答案: 乙醇;
丙酮;
甲醇
第五周 精华的积累和浓缩——沉淀法 第三、四节 课堂测验
1、 除了盐析沉淀法和有机溶剂沉淀法外, 常用的沉淀法还有哪些？
答案: 成盐沉淀法;
亲和沉淀 ;
用高分子聚合物和表面活性剂进行沉淀 ;
等电点沉淀法
2、 下列哪些关于等电点沉淀法的说法是正确的？
答案: 等电点沉淀法主要适用于水化程度不大, 在等电点时溶解度很低的物质;
等电点时净电荷为零, 导致赖以稳定的双电层及水化膜的削弱或破坏, 分子间排斥电位降低, 吸引力增大, 能相互聚集起来, 发生沉淀
3、 金属盐沉淀生物活性物质已有广泛的应用，分离出沉淀物后, 应将复合物分解，去除金属离子可以采用下列哪些方法？
答案: 离子交换法 ;
使用螯合剂 EDTA;
通以 H2S 使金属变成硫化物而除去
4、 下列哪些关于金属盐沉淀法的应用是正确的？
答案: ZnSO4 能沉淀红霉素发酵液中的杂蛋白;
锰盐能选择性地沉淀核酸 ;
锌盐可用于沉淀杆菌肽和胰岛素;
CaCO3 可用来沉淀乳酸、 柠檬酸、 人血清蛋白
5、 面哪些有机酸能够与蛋白质形成复合物而沉淀析出？
答案: 鞣酸;
雷凡诺 ;
三氯乙酸 (TCA)
6、 高分子聚合物沉淀法中应用最多的是 PEG，下列哪些说法是正确的？
答案: 合适的PEG能使蛋白质水合作用减弱而发生沉淀;
PEG属于水溶性非离子型高分子聚合物;
少量 PEG 的除去, 可将沉淀物溶于磷酸缓冲液, 然后用 DEAE-纤维素离子交换剂吸附蛋白质, PEG 不被吸附而除去
7、 下列关于表面活性剂沉淀法说法正确的是？
答案: 十六烷基氯化吡啶 (CPC)是用于分离粘多糖的有效沉淀剂;
十六烷基三甲基季胺溴化物 (CTAB) 是用于分离粘多糖的有效沉淀剂;
CTAB 的沉淀效力极强, 能从很稀的溶液中 (如万分之一浓度) 通过选择性沉淀回收黏多糖
8、 下列关于结晶的说法正确的是?
答案: 过饱和度是结晶的推动力;
结晶是指溶质自动从过饱和溶液中析出形成新相的过程;
溶液浓度等于溶质溶解度时, 该溶液称为饱和溶液
9、 过饱和溶液的形成可以采用下列哪些方式？
答案: 蒸发法;
等电点法;
微量扩散法;
加入某些有机溶剂
10、 下列关于通过蒸发法来结晶的说法错误的是？
答案: 蒸发法不要求物质有一定的热稳定性;
蛋白质或酶类物质的结晶则宜采用此方法
11、 下列关于有机溶剂结晶法的说法错误的是？
答案: 结晶残液中的有机溶剂无需回收;
有机溶剂不会引起蛋白质等物质变性
12、 下列关于微量扩散结晶法的说法正确的是？
答案: 因用样少, 条件易控, 可以对该溶质的结晶条件进行广泛的摸索和筛选;
由于是气相扩散, 结晶条件的形成和发展十分缓慢而连续, 对生成颗粒大的 单晶比较有利 (可供 X 射线衍射研究);
样品需量甚微, 只要 10uL 以上的样液即可进行操作;
具体方法是将少量结晶样品溶液与相应的沉淀剂一道置于一个密封的环境中, 通过气相扩散使样品中溶质达到饱和, 慢慢长成晶体
13、 晶体的质量主要是指？
答案: 晶体的大小;
晶体的形状 ;
晶体的纯度
14、 影响晶体大小的主要因素是哪些？
答案: 过饱和度;
温度;
搅拌速度;
晶种
15、 通过下列哪些途径可以改变晶体外形？
答案: 控制过饱和度;
控制晶体生长速度;
控制结晶温度 ;
调节溶液的 pH
第六周 围拢团结到核心——吸附法 第一节第二节 课堂测验
1、 下列哪些关于吸附法的说法是正确的？
答案: 吸附法 (adsorption method) 指利用吸附作用, 将样品中的生物活性物质或杂质吸附于适当的吸附剂上, 利用吸附剂对活性物质和杂质间吸附能力的差异, 使目的物和其他物质分离, 达到浓缩和提纯目的的方法;
吸附法比较快速, 许多吸附剂又相当廉价 ;
吸附法的设备简单
2、 列哪些关于“正吸附”或“负吸附”的说法是正确的？
答案: 吸附提取液中的有效成分, 称作 “正吸附” ;
吸附法还常用于去除提取液中的杂质, 如用活性炭脱色等, 称为 “负吸附”
3、 下列哪些关于吸附作用的说法是正确的？
答案: 物质从流体相 (气体或液体) 浓缩到固体表面从而达到分离的过程称为吸附作用 (adsorption), 在表面上能发生吸附作用的固体微粒称为吸附剂 (absorbent),而被吸附的物质称为吸附物 (adsorbate);
如果在吸附剂和吸附物之间有电子的转移, 发生化学反应而产生化学键, 这种吸附称为化学吸附 ;
当吸附剂和吸附物之间作用力是通过分子间引力 ( 范德华力) 产生的吸附称为物理吸附;
物理吸附是可逆的, 可以成单分子层吸附或多分子层吸附, 选择性较差
4、 下列哪些关于吸附法的说法是错误的？
答案: 吸附法的设备复杂 ;
吸附法的操作十分复杂
5、 下列哪些关于吸附作用的说法是错误的？
答案: 物理吸附和化学吸附作用是不能同时发生的;
物理吸附是不可逆的
6、 影响吸附的因素主要包括哪些？
答案: 吸附剂的特性;
吸附物浓度与吸附剂用量;
吸附条件;
吸附物的性质
7、 下列关于增加吸附剂的吸附容量的说法正确的是？
答案: 吸附现象在界面发生, 因此吸附剂比表面积愈大, 吸附量愈多;
可通过将吸附剂磨碎成小的颗粒来增加吸附剂表面积;
通过活化的方法也可增加吸附剂的吸附容量;
所谓吸附剂的活化, 就是通过处理使其表面具有一定的吸附特性或增加表面积
8、 下列关于吸附剂的说法正确的是?
答案: 一般极性吸附剂易吸附极性物质;
一般非极性吸附剂易吸附非极性物质;
极性吸附剂适宜从非极性溶剂中吸附极性物质;
非极性吸附剂适宜从极性溶剂中吸附非极性物质
9、 下列关于吸附条件的说法正确的是?
答案: 吸附热越大, 温度对吸附的影响越大。;
一般用单溶剂吸附, 用混合溶剂解吸。;
盐类对吸附作用的影响比较复杂，盐的浓度对于选择性吸附很重要,在生产工艺中也要靠实验来确定合适的盐浓度。;
溶液的 pH 可控制吸附剂或吸附物解离情况, 进而影响吸附量, 对蛋白质或酶类等两性物质, 一般在等电点附近吸附量最大。
10、 下列哪些吸附剂属于有机吸附剂？
答案: 活性炭;
聚酰胺;
纤维素
11、 下列哪些吸附剂属于无机吸附剂？
答案: 人造沸石;
氧化铝;
碳酸钙
12、 下列关于活性炭的说法正确的是？
答案: 活性炭是—种吸附能力很强的非极性吸附剂;
活性炭的吸附作用在水溶液中最强, 在有机溶液中较弱, 溶剂中吸附能力的顺序如下: 水 > 乙醇 > 甲醇 > 乙酸乙酯 > 丙酮 > 三氯甲烷;
活性炭常用于去除色素和热原等
13、 下列关于氧化铝的说法正确的是？
答案: 酸性氧化铝适用于天然及合成酸性色素及某些醛、酸的分离 ;
氧化铝有碱性、 中性和酸性之分;
活性氧化铝是最常用的一种吸附剂, 特别适用于亲脂性成分的分离;
氧化铝的活性与含水量的关系很大, 在一定的温度下除去水分后以使氧化铝活化；活化了的氧化铝再引入一定量水即可使活性降低
14、 下列关于磷酸钙凝胶的说法正确的是？
答案: 磷酸钙凝胶, 按制备方法的不同,磷酸钙凝胶可制成多种形式, 如磷酸钙、 磷酸氢钙、 羟基磷灰石 (又名羟基磷酸钙[Ca5(PO4)3· OH]);
磷酸钙凝胶常用于蛋白质的分离精制;
一般认为磷酸钙对蛋白质的吸附作用主要是其中 Ca2+与蛋白质负电基团结合
15、 下列关于硅胶或硅藻土的说法正确的是？
答案: 活化后的硅胶极易吸水而降低活性, 一般在用前于 110度再活化 0. 5 ~ 1h 后使用;
硅胶能吸附非极性化合物, 也能吸附极性化合物
第六周 围拢团结到核心——吸附法 第三节 课堂测验
1、 关于大孔网状树脂定义以下说法正确的是
答案: 它和大孔网状离子交换树脂具有相同的大网格骨架;
在合成树脂时, 加入一种惰性组分, 它不参与聚合反应, 但能和单体互溶, 称为致孔剂。;
其孔径远大于 2 ~ 4nm, 可达到 100nm 。;
有不受外界条件影响的永久孔隙
2、 与活性炭等经典吸附剂相比, 大孔网状聚合物吸附剂优点
答案: 选择性好;
解吸容易;
理化性质稳定;
可反复使用
3、 大孔网状聚合物吸附剂按骨架的极性强弱可分为
答案: 非极性;
中等极性;
强极性;
极性
4、 以下说法正确的是
答案: 大孔网状树脂吸附非极性有机化合物的作用力主要为范德华力;
对于不解离的有机化合物，溶液pH几乎不影响大孔网状树脂的吸附量;
对于可解离的有机化合物，溶液pH的改变，将影响大孔网状树脂的吸附量;
无机盐的存在通常会增加大孔网状树脂的吸附量
5、 大孔网状聚合物吸附剂吸附物质时，关于吸附条件选择说法正确的是
答案: 溶液的 pH 会影响弱电解质的离解程度, 因此也影响其吸附量。;
如用 XAD-4 从废水中吸附酚时, 选用pH 3。;
红霉素在碱性条件下易破坏, 因此实际应用中在pH 8进行吸附。;
用大孔网状吸附剂提取有机物时, 不必考虑盐类的存在。
6、 大孔网状吸附剂对有机物质的吸附后，通常解吸有下列几种方法：
答案: 最常用的是以低级醇、 酮或其水溶液解吸;
对弱酸性物质可用碱来解吸;
对弱碱性物质可用酸来解吸;
如吸附系在高浓度盐类溶液中进行时, 则常常仅用水洗就能解吸下来
7、 以下可以提高大孔吸附树脂CAD-40对红霉素吸附量的方法是
答案: 将溶液pH值调整到弱碱性进行吸附;
适当降低流速，延长吸附时间
8、 市售大孔吸附干树脂在使用前，需要进行预处理，以下操作正确的是：
答案: 用甲醇过大孔吸附树脂柱清洗到洗出液加水无沉淀析出;
用去离子水将残留在柱子中的甲醇清洗干净
9、 与凝胶型吸附树脂相比，大孔吸附树脂有以下哪些优点：
答案: 具有永久性的“大孔”，便于较大的分子进入;
同样骨架的树脂，大孔吸附树脂对于大分子的吸附量高于凝胶型树脂;
对于分子量较大的物质，大孔吸附树脂的吸附速度快于凝胶型树脂;
适用范围广，被广泛应用于生物活性物质的分离纯化
10、 对于大孔吸附树脂的再生和保存，以下说法正确的是
答案: 常用一种或多种有机溶剂如甲醇、乙醇清洗再生;
再生后的大孔吸附树脂可浸泡于乙醇中湿法保存备用
11、 具有以下功能团的树脂，属于极性大孔吸附树脂的有：
答案: 硫氧基;
酰胺
12、 以下会影响大孔吸附树脂对头孢菌素吸附能力的是：
答案: 树脂骨架结构;
孔隙大小;
树脂骨架极性;
头孢菌素发酵液的pH值
第七章 距离不一的赛跑——凝胶层析 第一二节课堂测验
1、 以下哪些是凝胶层析的别名
答案: 分子筛层析;
排阻层析;
限制扩散层析;
凝胶扩散层析
2、 柱的总体积为 Vt包括下列哪些
答案: 填料的骨架体积 Vg;
填料的孔体积 Vi ;
填料颗粒之间的体积 V0
3、 凝胶层析有以下特点
答案: 凝胶层析操作简便, 所需设备简单;
分离效果较好, 重复性高;
适用于各种生化物质, 如肽类、 激素、 蛋白质、 多糖、 核酸的分离纯化等 ;
分离条件缓和，不易引起变性
4、 关于排阻系数说法正确的是
答案: 当 Kd = 1 时, 洗脱体积 Ve = V0 + Vi, 为全渗入;
当 Kd = 0 时, 洗脱体积 Ve = V0 , 为全排阻;
0 < Kd < 1 时, 洗脱体积 Ve = Vo + KdVi, 为部分渗入
5、 关于交联葡聚糖下列说法正确的是
答案: 交联葡聚糖的基本骨架是葡聚糖;
它是由1,6-糖苷键连接多个D-葡萄糖残基组成的线性分子;
经交联剂以醚键交联而成的三维网状结构的高分子化合物 ;
其交联度是通过交联剂的加量及反应条件来控制的
6、 葡聚糖凝胶的性质
答案: 葡聚糖凝胶能被强酸、强碱和氧化剂破坏;
葡聚糖凝胶含有少量羧基, 故对阳离子有轻微的吸附作用;
芳香族化合物和杂环化合物在葡聚糖凝胶上有时表现出滞留现象;
第一次使用的新凝胶柱会吸附少量的蛋白质, 使回收率下降
7、 葡聚糖凝胶保存方法正确的有
答案: 可使用干法保存;
可使用湿法保存;
还可用半缩法 ;
使用湿法保存时，可以添加适量的防腐剂如叠氮化钠
8、 修饰葡聚糖凝胶包括
答案: 亲脂性葡聚糖凝胶;
交联葡聚糖离子交换剂;
Supperdex 系凝胶
9、 关于聚丙烯酰胺凝胶说法正确的是
答案: 聚丙烯酰胺凝胶是一种全化学合成的人工凝胶;
其商品名为生物凝胶-P;
生物凝胶的孔径可以通过调整交联度, 即聚合时双体的加入比例以及凝胶总浓度加以控制 ;
与葡聚糖凝胶相比生物凝胶的化学稳定性好
10、 关于琼脂糖凝胶说法正确的是
答案: 琼脂糖凝胶骨架各线形分子间没有共价键的交联;
其结合力仅仅为氢键, 键能比较弱;
凝胶孔径依赖于琼脂糖的浓度
11、 葡聚糖凝胶商品称作Sephadex G，字母G后的编号有何意义？
答案: 字母G后的编号为其吸液量的10倍;
间接反映了凝胶的溶胀时间;
间接反映了凝胶孔径的大小;
间接反映了凝胶渗入限和排阻限的大小
12、 葡聚糖凝胶因为含有少量羧基，故对阳离子有轻微的吸附作用，克服的方法是
答案: 使用前先用廉价、较惰性的蛋白质如牛血清白蛋白过柱饱和吸附，充分洗涤至无蛋白流出再使用;
增大流动相的离子强度
13、 对于葡聚糖凝胶Sephadex G-25，以下说法正确的是
答案: 等量干胶充分溶胀，吸水量高于Sephadex G-15;
1克干胶可吸水2.5ml
14、 聚丙烯酰胺凝胶是一种全化学合成的人工凝胶，其商品名为生物凝胶-P，如Bio-Gel P-100，字母P后的编号的含义是
答案: 乘以1000为它的排阻限;
P值越大表明排阻限越大
15、 聚丙烯酰胺凝胶的特点有
答案: 化学稳定性好;
机械强度好;
无非特异吸附作用;
不为微生物所利用
第七章 距离不一的赛跑——凝胶层析 第三四五节课堂测验
1、 关于类分离表述正确的是
答案: 类分离目的是分离样品分子量悬殊的两类物质;
选择凝胶时, 应使样品中大分子组的分子量大于其排阻限, 而小分子组的分子量小于渗入限;
使大分子的分配系数 Kd = 0, 小分子的 Kd = 1, 这样能取得最好的分离效果;
蛋白质进行脱盐的操作属于类分离
2、 关于分级分离表述正确的是
答案: 分级分离又称组分分离, 目的是分离分子量不很悬殊的大分子物质;
选择凝胶型号时必须使各种物质的Kd值尽可能相差大一些;
不能使它们的分子量都分布在凝胶分离范围的一侧，而要使各组分的分子量尽可能分布在凝胶分离范围的两侧或接近两侧的位置
3、 于柱比表述正确的是
答案: 层析柱的长度与直径的比值称作 “柱比“;
柱比与层析分离效果密切相关;
对于类分离, 柱床体积一般为样品溶液体积的5倍或略多，柱比5到10即可;
对于分级分离, 则要求柱床体积大于样品体积 25 倍以上， 柱比在 25 ~ 100
4、 对于葡聚糖凝胶床的检查表述正确的有
答案: 对装好的凝胶柱先用眼观察有无凝胶分层、沟流和气泡等现象;
为了进一步检查凝胶柱的质量，通常用一种大分子的有色物质溶液过柱，观察柱床有无沟流，色带是否平整;
常见的检查物质为蓝色葡聚糖
5、 关于凝胶层析的洗脱表述正确的有
答案: 为了防止柱床积的变化，整个洗脱过程中始终保持一定的操作压;
流速不宜过快且要稳定;
分离蛋白时常采用缓冲盐溶液进行洗脱;
洗脱时的流速与操作压有关, 与凝胶的型号和粒度也有关
6、 关于分离度表述正确的是
答案: 通过分离度可判断分离物质在色谱柱中的分离情况;
提高分离度的方法有增大洗脱体积的差值或减小两物质洗脱峰的体积;
当分离度 R 值 > 1, 两物质完全分开, 小于 1 时则不能完全分离;
分离度与洗脱体积的差值成正比，而与两物质的洗脱峰宽度成反比
7、 溶液通过色谱柱造成的峰加宽效应包括
答案: 分子扩散;
流动相中传质阻力;
固定相中传质阻力 ;
涡流扩散
8、 关于凝胶层析在脱盐上的应用，表述正确的是
答案: 脱盐用的凝胶多为大粒度的、高交联度的凝胶;
交联度大凝胶颗粒的强度较好，凝胶粒度大流速高;
样品体积最好不大于内水体积的三分之一，以便得到理想的脱盐效果;
用柱层析法脱盐时，要求样品的体积必须小于凝胶柱的内水体积Vi
9、 关于分子量测定以下表述正确的是
答案: 用凝胶过滤层析测定生物大分子的分子量，操作简便而且所需仪器简单;
在凝胶的分离范围内洗脱体积Ve及分配系数 Kd 值随分子量增加而下降;
常用于蛋白质、 酶、多糖等大分子药物的分子量测定
10、 凝胶层析适用于分离
答案: 分子量不同的成分;
分子大小不同的成分
11、 凝胶层析中，有时溶质的Kd>1，以下不是造成Kd>1的原因包括
答案: 凝胶排斥 ;
柱床过长 ;
流速过低
12、 凝胶层析中，有时小分子物质的Kd值却<1，其原因可能是
答案: 小分子物质的水合作用;
凝胶本身的水合作用
第八周 电荷的自发选择——离子交换 第八章 1-2节课堂测验
1、 下列哪些关于离子交换的说法是正确的？
答案: 离子交换法 (ion exchange process) 是利用溶液中各种带电粒子与离子交换剂之间结合力的差异进行物质分离的操作方法 ;
离子交换法必须使用离子交换剂 ;
带电粒子与离子交换剂间的作用力是静电力，它们结合是可逆的。
2、 离子交换剂由下列哪些部分组成？
答案: 惰性的不溶性载体 ;
平衡离子;
功能基团
3、 离子交换树脂上洗脱目的物的方法主要有下列哪些方法？
答案: 调节洗脱液的 pH 值, 使目的物粒子在此 pH 下失去电荷, 甚至带相反电荷,从而丧失与原离子交换树脂的结合力而被洗脱下来;
用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来
4、 离子交换技术在蛋白纯化中的应用甚为广泛, 下列哪些关于离子交换来纯化蛋白的说法是正确的？
答案: 在 pH 大于蛋白的等电点的适当离子强度溶液中, 蛋白带负电荷;
在 pH 小于蛋白的等电点时, 蛋白带正电荷
5、 下面哪些关于离子交换树脂的活性基团的说法是正确的？
答案: 决定了树脂是酸性的阳离子交换剂还是碱性的阴离子交换剂 ;
是决定其交换特点的主要物质基础;
决定了树脂的交换能力 ;
是离子交换剂分类的主要依据
6、 下面哪些关于阳离子交换树脂的说法是正确的？
答案: 阳离子交换树通常可按其酸性之强弱可以分为强酸型、中强酸型和弱酸型;
弱酸型树脂主要是羧酸型树脂和酚型树脂, 功能基团分别为羧基 (—COOH) 和酚基 ;
中强酸型树脂主要是磷酸型树脂, 功能基团为磷酸根 (—PO3H2);
强酸型树脂主要是磺酸型树脂。功能基团为磺酸根 (—SO3H ) 及甲基磺酸(—CH2SO3H)
7、 下面哪些关于阳离子交换树脂交换能力的说法是正确的？
答案: 离子交换树脂的实际交换能力受自身解离情况的影响;
强酸型交换树脂的交换能力几乎不受环境 pH 值的影响，它在很宽的 pH 范围内都保持良好的交换能力;
弱酸型的阳离子交换树脂在酸性环境中的解离度受到抑制, 故交换能力差, 只有在碱性或中性环境中有较好的交换能力
8、 下面哪些关于阴离子交换树脂的说法是正确的?
答案: 中强碱型阴离子交换树脂则兼有弱碱性和强碱性两类活性基团，二者的比例决定其碱性强弱;
弱碱型阴离子交换树脂的活性基团是伯、 仲、 叔氨基, 即—NH2, —NHR, —NR2,吡啶基等;
强碱型阴离子交换树脂的功能基团多为季铵盐;
阴离子交换树脂也可根据功能基团的种类不同分为强中弱三类
9、 下面哪些关于阴离子交换树脂交换能力的说法是正确的？
答案: 强碱型离子交换树脂的交换能力受 pH 环境的影响较小。;
弱碱型阴离子交换树脂的交换能力同样受自身解离程度的影响, 在碱性环境中交换能力低, 仅适应于在中性及酸性环境中使用;
各种树脂的强弱最好用其功能团pK值来表征；对于碱性树脂, pK值愈大, 碱性愈强
10、 下列关于各类离子交换树脂命名编号的说法错误的是？
答案: 1 ~ 99 号是强碱类;
100 ~ 199 号是强酸类
11、 下列关于各类离子交换树脂命名编号的说法正确的是？
答案: 200 ~ 299 号是强碱类;
300 ~ 399 号是弱碱类;
400 ~ 499 号是螯合类
12、 下列关于苯乙烯型离子交换树脂的说法正确的是？
答案: 苯乙烯型离子交换树脂的骨架由苯乙烯与二乙烯苯经过氧苯甲酰催化聚合而成;
由苯乙烯和二乙烯苯的共聚物作为骨架, 再引入所需要的酸性基或碱性基;
聚合时, 调节加入不同的悬浮液稳定剂和控制介质的温度、 黏度及机械搅拌速度可得到不同大小规格的树脂;
改变二乙烯苯的量则可得到不同交联度的树脂
13、 下列关于丙烯酸型阳离子交换树脂的说法正确的是？
答案: 丙烯酸型阳离子交换树脂在载体聚合前已将活性基团引入单体;
将丙烯酸甲酯与二乙烯苯以过氧化苯甲酰作为引发剂, 在水相悬浮聚合, 共聚物再经水解即可得到该树脂;
这一类型的有弱酸 101 * 4 (724) 树脂 ;
属于这类树脂的有弱酸 110 树脂, 用于链霉素提炼。
14、 除了多乙烯多胺-环氧氯丙烷树脂和聚乙烯吡啶系离子交换树脂，关于其他离子交换树脂的说法正确的是？
答案: 由丙烯酸或甲基丙烯酸在季胺型阴离子交换树脂 (如 Dowex) 中聚合而成的一类树脂称蛇笼树脂 ;
选择性离子交换剂是利用某些特殊的有机化合物可与某些金属离子起选择性反应的原理而制得;
螯形树脂是利用金属离子与有机试剂生成螯形化合物的性质而设计制备的;
吸附树脂是一类有很大的表面积, 吸附能力强, 但离子交换能力很小的树脂, 主要用于脱色和除去蛋白质等, 也称为 “脱色树脂”
15、 下列关于常用的离子交换树脂的牌号和对应性质的说法正确的是？
答案: 732是强酸型树脂 ;
711是强碱型树脂
第八周 电荷的自发选择——离子交换 第八章 3-5节课堂测验
1、 影响离子交换速度的因素有哪些？
答案: 树脂粒度和树脂交联度;
离子半径和离子价 ;
温度和搅拌速度 ;
离子浓度
2、 下列哪些关于离子交换速度的说法是正确的？
答案: 交换离子向内扩散的速度与树脂粒子半径的平方呈反比 ;
平衡离子向外扩散的速度与树脂粒子半径成反比;
树脂粒度大交换速度慢
3、 下列哪些关于离子交换速度的说法是正确的？
答案: 搅拌速度能影响膜扩散速度, 与交换速度呈正相关 ;
搅拌速度增大到一定程度后影响渐小;
离子水合半径增大, 交换速度下降;
离子每增加一个电荷, 交换速度下降一个数量级
4、 下列哪些关于离子交换速度的说法是错误的？
答案: 大分子在树脂中的扩散速度特别快;
交换体系温度高时由于离子扩散减慢, 交换速度也减慢
5、 离子交换树脂的基本要求有哪些？
答案: 有尽可能大的交换容量 ;
有良好的交换选择性;
化学性质稳定和化学动力学性能好 ;
物理性能好
6、 影响树脂性能的因素包括哪些？
答案: 离子交换树脂具有的功能基团性质;
离子交换树脂具有的功能基团的数目;
树脂的交联度;
树脂骨架和平衡离子
7、 离子交换树脂的主要理化常数的测定包括哪些？
答案: 含水量和膨胀度;
湿真密度;
交换容量;
滴定曲线
8、 下列关于离子交换树脂的含水量及测定的说法正确的是?
答案: 含水量的测定也是树脂交联度的间接测定。;
树脂含水量实质上是颗粒内部网格上存在的溶胀水。;
干燥测定法通过树脂在 105度下烘干前后的重量加以计算求得。;
离心测定法是将树脂在 400g 离心力作用下离心 30 分钟甩去溶胀水。
9、 下列关于离子交换树脂的交换容量的说法正确的是?
答案: 交换容量是树脂最重要的特征参数;
离子交换树脂功能基团的数目是交换容量的基础;
交换容量的单位可以是 meq / g 树脂 (毫克当量/ 克树脂);
交换容量的单位可以是体积交换容量, 即 meq / ml 湿树脂
10、 下列关于离子交换树脂的交换容量的测定之说法正确的是?
答案: 阳离子交换树脂 (氢型) 的测定方法是: 向一定数量树脂中加入 NaOH 溶液, 一天或数天后测定 NaOH 的剩余量, 从消耗的碱量即可求出它的交换容量。;
对阴离子交换树脂, 因羟型不太稳定, 市售多为氯型。 测定方法是: 取一定量的树脂装柱, 用过量的 Na2SO4溶液进行离子交换洗脱, 测定流出液中氯离子总量, 即可求知树脂的交换容量。;
对生物大离子的实际交换容量要比总交换容量小得多
11、 下列关于离子交换树脂的滴定曲线的说法正确的是？
答案: 和无机酸、 碱一样, 离子交换树脂也有滴定曲线;
以每克干树脂所加的 NaOH 或 HCl 毫克当量数为横坐标, 以平衡 pH 值为纵坐标, 就得到滴定曲线。;
对于强酸性或强碱性树脂, 滴定曲线有一段是水平的, 到某一点即突然升高或降低;
对于弱碱或弱酸性树脂, 则无水平部分, 曲线逐步变化
12、 滴定曲线能较全面地表征树脂功能团方面的性质的原因是？
答案: 滴定曲线的转折点的位置, 可估计其总交换容量;
由转折点的数目, 可推知功能团的种类数;
曲线还表示交换容量随 pH 的变化
13、 影响离子交换选择性的因素有
答案: 离子水合半径;
离子价及离子浓度;
树脂的交联度;
溶液环境的酸碱度
14、 关于溶液的酸碱度对离子交换选择性的影响说法正确的是
答案: 溶液的酸碱度直接决定树脂交换基团及交换离子的解离程度;
溶液的酸碱度不但影响树脂的交换容量，对交换的选择性影响也很大;
对于强酸、强碱性树脂, 溶液pH主要是左右交换离子的解离度，决定它带何种电荷以及电荷量，从而可知它是否被树脂吸附或吸附的强弱;
对生物活性分子而言，过强的吸附以及剧烈的洗脱条件会增加变性失活的机会
15、 关于溶液的离子浓度对离子交换选择性的影响说法正确的是
答案: 高的离子浓度必与目的物离子进行竞争, 减少有效交换容量;
离子的存在会增加蛋白质分子以及树脂活性基团的水合作用，降低吸附选择性和交换速 度;
在保证目的蛋白质的溶解度和溶液缓冲能力的前提下，尽可能采用低离子强度
16、 关于树脂结构对离子交换选择性的影响主要包括以下几方面
答案: 树脂载体交联度;
辅助力—-主要是氢键和范德华力;
其他结合力—–如某些树脂对金属离子有特殊的亲和力
17、 选择离子交换树脂的主要依据是
答案: 被分离物的性质和分离目的;
根据分离要求和分离环境保证分离目的物与主要杂质对树脂的吸附力有足够的差异;
当目的物具有较强的碱性或酸性时，宜选用弱酸性或弱碱性的树脂;
如目的物是弱酸性或弱碱性的小分子物质时，往往选用强碱或强酸树脂
第八周 电荷的自发选择——离子交换 第八章 6-9节课堂测验
1、 关于离子交换树脂的再生处理说法正确的是
答案: 可用10倍量的 1mol / L盐酸及氢氧化钠溶液交替浸泡;
强酸性阳树脂来说，若酸—碱—酸处理，最后一步用酸处理使之变为氢型树脂的操作也可称为“转型”;
转型完毕的树脂还须用相应的缓冲液平衡数小时后备用;
对强酸性阳树脂来说, 碱—酸—碱处理便可得到钠型树脂
2、 关于离子交换洗脱说法正确的是
答案: 离子交换完成后将树脂所吸附的物质释放出来重新转入溶液的过程称作“洗脱“;
洗脱方式也分静态与动态两种;
酸、碱洗脱液旨在改变吸附物的电荷或改变树脂活性基团的解离状态，以消除静电结合力迫使目的物被释放出来;
盐类洗脱液是通过高浓度的带同种电荷的离子与目的物竞争树脂上的活性基团，使吸附物游离
3、 大孔型离子交换树脂的特征是
答案: 载体骨架交联度高，有较好的化学和物理稳定性及机械强度;
孔径大，且为不受环境条件影响的永久性孔隙，甚至可以在非水溶胀下使用;
表面积大，表面吸附强，对大分子物质的交换容量大;
孔隙率大
4、 离子交换纤维素的特点
答案: 离子交换纤维素为开放的长链骨架,，大分子物质能自由地在其中扩散和交换，亲水性强，表面积大，易吸附大分子;
交换基团稀疏，对大分子的实际交换容量大;
吸附力弱，交换和洗脱条件缓和，不易引起变性;
分辨力强，能分离复杂的生物大分子混合物
5、 离子交换纤维素进行吸附后，洗脱方法有
答案: 升高环境的pH;
降低 pH;
加离子强度
6、 关于离子交换纤维素的处理和再生说法正确的是
答案: 浸泡用的酸碱浓度要适当降低;
处理时间也从 4h缩短为 0 .3 ~ 1h;
离子交换纤维素，相对来说不耐酸，所以用酸处理的浓度和时间须小心控制;
对阴离子交换纤维素来说, 即使在pH 3的环境中长期浸泡也是不利的
7、 关于混合床以下说法正确的是
答案: 混合床优点是可避免在脱盐过程中溶液酸碱度的变化;
在链霉素精制中, 可用强酸 1 25 和弱碱 311 4树脂组成混合床脱盐;
混合床的再生操作不便
8、 利用离子交换树脂制备无盐水说法正确的是
答案: 阳离子交换树脂一般用强酸性树脂;
阴离子交换树脂可以用强碱或弱碱树脂;
当对水质要求高时，经过一次组合脱盐还达不到要求，可采用两次组合如强酸-弱碱-强酸 -强碱
9、 关于门冬酰胺酶纯化工艺，描述正确的是
答案: 重组 L-门冬酰胺酶pI为4.85，属于酸性蛋白质;
在实验条件下 (5mmol / L 磷酸缓冲液, pH 6.4 ), 此酶带负电荷;
可以通过改变洗脱液的盐离子强度 (50mmol / L 磷酸缓冲液 pH 6.4) 进行洗脱;
在实验条件下 (5mmol / L 磷酸缓冲液, pH 6.4 ), 此酶负电荷，可以使用DEAE-C吸附门冬酰胺酶
10、 关于色谱聚焦说法正确的是
答案: 色谱聚焦是一种高分辨的新型蛋白质纯化技术;
根据蛋白质的等电点，结合离子交换技术的大容量色谱，能分离几百毫克蛋白质样品;
洗脱峰被聚焦效应浓缩;
可用于水溶性的两性分子的分离，如蛋白质及酶等
11、 色谱聚焦的原理包括以下
答案: pH梯度的形成;
蛋白质的色谱行为;
聚焦效应
12、 关于色谱聚焦中pH梯度的形成说法正确的是
答案: 色谱聚焦利用离子交换剂本身的带电基团的缓冲作用，当洗脱缓冲液不断滴到离子交换柱上时, 柱内自动形成pH梯度;
洗脱过程中在柱上某位点的pH随着更多的缓冲剂加入而逐渐下降;
形成 pH 9 ~ 6 的下降梯度，可选择用起始缓冲液平衡到 pH 9，洗脱液的pH选定为pH 6, ;
整个色谱柱被洗脱液所平衡, 最后流出液的pH等于洗脱液的pH
13、 关于蛋白质的色谱行为说法正确的是
答案: 蛋白质所带的电荷取决于它们的等电点和介质的pH;
当介质的pH低于它的等电点时, 蛋白质带正电荷，它不与阴离子交换剂结合随洗脱液向下移动;
蛋白质从柱顶向下移的过程中其周围pH逐渐增高，当它移动到某一点其环境的pH高于蛋白质等电点时，蛋白质由带正电荷变为负电荷而与离子交换剂结合;
不同的蛋白质有不同的等电点，在它们被离子交换剂结合以前将移动不同的距离，按等电点顺序流出
14、 关于聚焦效应说法正确的是
答案: 当一种蛋白质在柱上随洗脱液下移至等电点处，此时其移动速度明显减慢;
如果此时加上相同的第二个样品，它将以洗脱液移动的速度下降，直至追到正在慢移的第一个样品成分;
所有样品必须在第一个样品峰尚未被洗脱之前加入，否则就不能聚焦;
如果加入的第二个样品的等电点比第一个样品高，它可以越过第一个样品区先被洗脱出来
15、 关于多缓冲剂说法正确的是
答案: 多缓冲剂是一种两性电解质缓冲剂;
多缓冲剂是分子量大小不同的多种组分的多羧基多氨基化合物;
多缓冲剂性质与两性载体电解质相似;
多缓冲剂在280nm处吸收很低
16、 聚焦色谱中关于多缓冲交换剂说法正确的是
答案: 多缓冲交换剂是以交联琼脂糖6B为载体，并在糖基上通过醚键偶合上配基制成的;
多缓冲交换剂的交联性质使它有很好的物理稳定性和流速;
偶联于Sepharose 6B的配基经特别选择, 确保在很宽的pH范围内有均衡的缓冲容量;
它的盐型在pH 7时能耐受高压灭菌处理
17、 关于多缓冲交换剂和缓冲剂的选择说法正确的是
答案: 使用的多缓冲剂和多缓冲交换剂的pH间隔为3个单位;
为了提高分辨率, 选择的实验pH范围应包含要分离样品各组分等电点;
需有 2 / 3 ~ 1 / 2 柱长的吸附解吸时间;
PBE94是一种多缓冲交换剂
18、 聚焦色谱中从分离的蛋白质中去除多缓冲剂的方法
答案: 加入硫酸铵沉淀法;
凝胶过滤;
亲和色谱法;
疏水色谱法
第九周 特殊相互作用——亲和层析 第九章 第一节 课堂测验
1、 利用生物分子间的特异性结合作用进行生物物质分离纯化的技术即为亲和纯化技术，其技术的要点为下列哪些？
答案: 寻找可与底物 (S) 专一可逆结合的配基;
将配基 (L) 通过共价键偶联到基质, 并要求偶联后配基L与底物S的亲和力不变;
配基L与底物S吸附并与杂质分离, 将杂质洗出;
洗脱目标物, 即分离纯化
2、 下列哪些关于历史上利用生物亲和作用的原理纯化蛋白质的说法是正确的？
答案: 报道最早见于1910年, 当时发现不溶性淀粉可以选择性地吸附α-淀粉酶;
1951年 Campbell 等利用半抗原 (对氨苯甲基, p-aminobenzyl) 修饰纤维素制备的载体为亲和吸附介质 (affinity adsorbent) 从血清中纯化了抗体;
1967年 Axen和 Cuatrecasas 等开发了利用溴化氰活化琼脂糖凝胶制备亲和吸附介质的方法, 才使亲和纯化技术从研究走向实用;
20 世纪80年代以后，相继出现了亲和过滤、 亲和分配、 亲和反胶团萃取等亲和纯化技术
3、 亲和层析的优点包括哪些？
答案: 特异性强 ;
分离效果好;
分离条件温和
4、 亲和层析对载体的要求包括哪些？
答案: 载体必须具有高度的水不溶性和亲水性;
载体应具有多孔的立体网状结构, 能使被亲和吸附的大分子自由通过 ;
载体必须有较好的理化稳定性和生物惰性, 尽量减少非专一性吸附;
载体必须能充分功能化, 也就是说载体要具有足够数量的功能基团, 或能方便地引入多个化学活性基因, 以供与配基进行共价连接之用
5、 常用的亲和层析载体有哪些？
答案: 壳聚糖 ;
纤维素 ;
聚丙烯酰胺凝胶;
多孔玻璃珠
6、 下面关于亲和层析载体琼脂糖凝胶的说法正确的包括哪些？
答案: 是由 D-半乳糖和 3,6-脱水-L-半乳糖相互结合的链状多糖 ;
其琼脂糖浓度有 2% 、 4% 、 6% 几种;
这类载体能使吸附物质保持活性, 能迅速活化并接上各种功能基团, 结构疏松孔径大, 流速快 ;
载体几乎没有带电基团, 非专一性吸附少。
7、 下面关于亲和层析载体葡聚糖凝胶的说法正确的包括哪些？
答案: 是经环氧丙烷交联, 具有立体网格的多糖类物质 ;
其物理及化学性能比较稳定;
不可逆吸附杂质 (如变性蛋白、 脂类等) 可用强碱处理除去
8、 理想的配基应符合以下哪些要求？
答案: 配基与配体有足够大的亲和力;
配基与分离对象的结合应为专一性结合, 这样才能保证分离与纯化的效果;
配基应具有化学活性;
一般要求亲和势在
之间
9、 在亲和层析中关于配基的浓度说法正确的是?
答案: 随着配基浓度的增加, 非专一性吸附也增加, 而专一性吸附却降低;
配基浓度太高又会使吸附力太强, 造成洗脱上的困难;
当增加配基浓度有困难, 而亲和势又比较低时, 可用增加亲和柱的长度来提高吸附率;
对亲和势比较低的配基 (KL=10 -4mol / L), 增加配基浓度有利于吸附。
10、 关于亲和层析中配基分子大小的说法正确的是？
答案: 制备亲和柱时, 应首先选用大分子配基;
在载体和配基间可插入一个 “ 手臂”以消除空间障碍;
手臂的长度是有限的, 不可太短也不可太长, 太短不能起消除空间障碍的作用, 太长往往会使非特异性吸附增加
11、 关于亲和层析载体的活化的说法正确的是？
答案: 亲和层析载体如琼脂糖、 葡聚糖等, 在碱性条件下用溴化氰处理, 可引入活泼的 “亚氨基碳酸盐”中间体；再在弱碱的条件下直接可与含有游离脂肪氨基或芳香族氨基的配基偶联;
多糖与 0.1mol / L 的高碘酸钠氧化反应 24h 会产生醛, 在温和条件下, 醛与赖氨酸上的ε-NH2进行亲核攻击, 生成席夫碱, 接着用硼氢化钠还原, 生成稳定的烷基胺;
在热的浓碱溶液中, 多糖类化合物与环氧氯丙烷作用生成环氧化合物；在碱性条件下, 其环氧化合物又能与氨基酸或蛋白质上氨基偶联;
二乙烯砜等双功能试剂, 对琼脂糖类多糖的活化有许多优点: 反应速度快, 条件温和, 能与氨基、 糖类、 酚、 醇类等偶联
12、 亲和层析中常用于固定化配基的商品化的凝胶衍生物有哪些？
答案: CNBr 活化的 Sepharose 4B;
环氧活化型 Sepharose 6B;
AH-Sepharose 4B 和 CH-Sepharose 4B;
活化型亲和胶 10(Affi-Gel 10)和活化型亲和胶 15(Affi-Gel 15)
13、 亲和力大小除由亲和对本身的解离常数决定外, 亲和层析的效果还受哪些因素的影响？
答案: 亲和吸附剂的微环境;
载体空间位阻;
配基结构以及配基和配体的浓度;
载体孔径
14、 含氮配基在亲和层析中占有很大的比重,包括蛋白质、多肽、氨基酸衍生物和激素等，可以通过多种反应与载体之“手臂”相连接，连接方法主要有哪些？
答案: 重氮法;
碳二亚胺缩合法、;
双功能试剂法;
N-羟基琥珀酰亚胺法
15、 对于亲和层析中非专一性吸附的说法正确的是？
答案: 原因可能是离子效应;
原因可能是疏水基团;
原因可能是复合亲和力,即吸附剂的亲和结合过程,既涉及离子效应的应用,又有疏水作用;
对于亲和性高的系统,非特异性的相互作用是一种复杂的特性,建议除应用高浓度的盐和合适溶剂,为了获得最佳的纯化效果,还应对每一具体系统找出最佳的配基浓度、pH、离子强度和温度。
16、 亲和层析的洗脱的方式有哪些？
答案: 非专一性洗脱;
特殊洗脱;
专一性洗脱
17、 当一些蛋白质的吸附十分紧密,不能用非专一性吸附方法洗脱时,可用特殊的化学方法裂解配基与载体的连接键,获得的配基-蛋白质络合物，再用透析或凝胶过滤除去配基，以下方法正确的是？
答案: 二硫键用二硫苏糖醇和二硫赤藓糖醇等处理;
二硫键用巯基乙醇、半胱氨酸等处理;
偶氮键用含有 0.1mol / L 连二亚硫酸钠的 0. 2mol / L 硼酸缓冲液处理;
硫酯键用 pH 11.5(或 1mol / L)羟胺处理 30min
18、 对于亲和层析中专一性洗脱的说法正确的是？
答案: 可以是竞争性效应;
可以是非竞争性效应;
可以是反竞争性效应;
竞争性效应的洗脱方法又可称为正洗脱
19、 金属离子亲和层析( IMAC)是利用金属离子的络合或形成螯合物的能力吸附蛋白质的分离系统，其优点是？
答案: 吸附容量大;
成本很低
20、 随着生物技术的发展,还出现许多其他类型的亲和层析,如以下哪些？
答案: 免疫亲和层析;
拟生物亲和层析;
有机染料亲和层析;
生物亲和层析
第九周 特殊相互作用——亲和层析 第九章 第二节 课堂测验
1、 1. 关于亲和错流过滤说法正确的是
答案: ACFF 是将亲和层析与超滤技术结合，高分子底物经专一可逆的亲和反应后，用膜进行错流过滤，兼有亲和层析与膜过滤的优点;
ACFF的关键是大分子亲和配基及基质;
基质常是聚合物组成的内核，大分子的亲和配基连接在内核表面;
配基对所要提取的目标物进行专一可逆的吸附，形成复合体，然后用膜对混合液进行错流过滤，复合体因分子巨大可被保留，杂质则随液体透过膜，从而实现了目标物与其他成分的分离
2、 1. 关于亲和膜说法正确的是
答案: 利用亲和配基修饰的微滤膜为亲和吸附介质亲和纯化目标蛋白质;
亲和膜的纯化方法又称膜亲和层析;
是固定床亲和层析的变型;
将一张微滤膜比喻为一个固定床，则膜厚即为床层高度
3、 利用亲和膜的纯化过程具有如下优点
答案: 传质阻力小，达到吸附平衡的时间短;
配基利用率高;
压降小，流速快，设备体积小;
配基用量低
4、 关于亲和萃取说法正确的是
答案: 利用偶联亲和配基的PEG为成相聚合物进行目标产物的双水相萃取;
亲和萃取又称亲和分配;
在亲和配基的亲和结合作用下促进目标产物在 PEG相的分配，提高目标产物的分配系数和选择性;
常用的双水相体系有聚乙二醇/ 葡聚糖或聚乙二醇/ 无机盐
5、 关于亲和反胶团萃取说法正确的是
答案: 反胶团是表面活性剂在有机溶剂中形成的自聚集体，其内部的“水池”可溶解蛋白质等生物分子;
在反胶团相中除通常的表面活性剂以外，添加另一种亲水头部为目标分子的亲和配基的助表面活性剂;
通过亲和配基与目标分子的亲和结合作用，促进目标产物在反胶团相的分配
6、 关于亲和沉淀说法正确的是
答案: 是生物亲和相互作用与沉淀分离相结合的生物大分子的分离纯化技术;
根据亲和沉淀的机制不同，亲和沉淀又分两种，一次作用亲和沉淀和二次作用亲和沉淀;
一次作用亲和沉淀水溶性化合物分子上可偶联有两个或两个以上的亲和配基;
一次作用亲和沉淀机制与抗原-抗体的沉淀作用相似
7、 亲和沉淀纯化技术具有如下优点
答案: 配基与目标分子的亲和结合作用在溶液中进行，无扩散传质阻力，亲和结合速度快;
亲和配基裸露在溶液之中，可更有效的结合目标分子;
利用离心或过滤技术回收沉淀，易于规模放大;
亲和沉析法可用于高黏度或含微粒的料液中目标产物的纯化
8、 关于二次作用亲和沉淀说法正确的是
答案: 利用在物理场改变时溶解度下降、发生可逆性沉淀的水溶性聚合物为载体固定亲和配基，制备亲和沉淀介质;
亲和介质结合目标分子后，通过改变物理场使介质与目标分子共同沉淀的方法成为二次作用亲和沉淀;
进行亲和沉淀后，离心或过滤回收沉淀，即可除去未沉淀的杂蛋白;
沉淀经适当清洗后加入洗脱剂即可回收纯化的目标产物
9、 关于亲和电泳说法正确的是
答案: 是将亲和技术与电泳技术结合起来,将亲和技术的吸附剂包埋到琼脂凝胶板上制成 AEP 载体;
AEP包括外源凝集素亲和电泳和毛细管亲和电泳;
外源凝集素亲和电泳是利用外源凝集素对目标蛋白质的特异性作用进行亲和电泳;
毛细管亲和电泳将亲和技术应用于毛细管电泳
10、 根据亲和萃取法制备抑肽酶流程分析
答案: 双萃取体系的上相为聚乙二醇;
抑肽酶分子量为介于3kD及10kD之间
11、 关于镍亲和层析说法正确的是
答案: 可用于纯化带有6个组氨酸标签的重组蛋白;
将目的蛋白的N端联上6个组氨酸标签，洗脱是在一定 pH下采用不同浓度的咪唑洗脱;
Ni离子相当于配基
12、 关于GST-亲和层析说法正确的是
答案: 谷胱甘肽S-转移酶融合表达系统已经被广泛用于从 E-coli中获得大量的目的蛋白;
羧端含谷胱甘肽S-转移酶重组融合蛋白可以通过GST-亲和层析进行纯化;
大多数GST 融合蛋白可被过量的谷胱甘肽从亲和介质上洗脱下来;
在GST-融合蛋白的蛋白与 GST 标签之间，可选择性加入水解位点，利用蛋白酶可将 GST 标签水解得到目的蛋白
13、 研究生物分子的相互作用时经常用到亲和技术，以下说法正确的是
答案: GST pull down 技术可以用于研究蛋白相互作用;
将“诱饵”蛋白与GST 融合表达，当融合蛋白通过偶联了GSH 的介质时，可以通过 GSH 和 GST的亲和作用而吸附在介质上;
当加入细胞提取物时，与诱饵蛋白相互作用的蛋白就会被吸附到介质上，再对其分析鉴定;
这里的GSH属于亲和配基
第十周 旋转的艺术——离心技术 第十章第一二节 课堂测验
1、 关于相对离心力（relative centrifugal force, RCF）说法正确的是
答案: 相对离心力是离心力与重力的比值（倍数）;
相对离心力也称为离心“分离因素”，用“×g”或“g”表示;
相对离心力和转子角速度的平方成正比
2、 离心技术有多种形式，包括
答案: 离心沉降;
离心过滤;
离心分离;
离心分析
3、 关于制备型超速离心机说法正确的是
答案: 制备型超速离心机可用于制备生物大分子（主要是DNA）、细胞器、病毒、细胞等;
制备型超速离心机一般使用油旋转真空泵以减少摩擦生热带来的影响;
目前，超速离心机大多使用变频电动机驱动
4、 关于沉降速度说法正确的是
答案: 沉降速度是在离心力的作用下，物质离子于单位时间内沿离心力方向移动的距离;
沉降速度和离心半径成正比
5、 下列关于转子的说法正确的是
答案: 转子是超速离心机的核心设备之一;
转子的使用时间、次数及转速均有严格规定;
制备型离心机常用的转子有角度转子、水平转子及区带转子等;
转子一般用铝合金或钛合金制成
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